（1）试管斜面混合培养的母种扩大成原种的接种方法在无菌接种箱内，用经过灭菌的接种针，在母种的白毛团四周划一个圈，然后从中央钩起白毛团，迅速接人原种培养基中央。一支试管一般接一瓶原种。在母种数量有限的情况下，也可用接种刀将白毛团分划成2块，分别接入2个原种瓶中。
（2）木屑培养基混合培养的母种扩大成原种的接种方法选择已出现子实体的木屑母种供接种之用。在无菌箱内，用酒精棉球擦拭母种瓶的外壁，瓶口用火焰烧灼，用接种刀切除去子实体，再将耳基、培养基表面老菌丝和黑疤（点）清除干净。用接种铲将耳基正下方及周围1～3厘米范围内由银耳纯白菌丝、香灰菌丝和培养基扭结一起的基质块捣碎，最后用接种匙挑取花生米大小的菌种，接入原种瓶培养基上。一般每瓶木屑母种扩接原种20～40瓶。原种培养含水量应控制在55％～58％左右，稍干些有利于银耳纯白菌丝生长，而不易产生酵母状分生孢子，有利于扩大为栽培种。原种培养基装瓶深2／5，即7～8厘米。
（3）培养管理接种后的原种瓶要及时搬人经消毒灭菌过的培养室内，分层摆放于培养架上，瓶间留1～3厘米空隙，便于散热。培养温度初期为24～25℃，7～8天后蒯为22～24％，室内空气相对湿度要低，控制在65％左右，以防杂菌孳生。培养室加强通风换气，保持室内空气清新、干燥，并防止瓶温升高。不能有阳光直射菌瓶，环境要暗。从培养后的第三天起，应逐日检查菌丝生长和杂菌污染情况，如在培养基上发现有红、绿、黄、黑等杂菌污染，要立即淘汰。在22～24~C~度下培养10天左右出现白毛团，15～20天白毛团分泌淡黄色或浅褐色水珠，随后白毛团逐渐胶质化并出现淡黄色原基，最后出现子实体。香灰菌丝生长健壮，并能分泌黑色素，种瓶内壁上可见黑色花纹和少量黑疤。经25天左右培养即成银耳原种（二级种）。