试管斜面是培养一级种的营养物质。它是根据银耳菌丝生长的营养需要配制而成，各种培养基配方不同，但制作方法大同小异，这里以马铃薯培养基制作方法为例：
（1）称量溶化取汁将马铃薯洗净去皮（已发芽的要挖掉芽眼），称取200克切成薄片，置于铝锅加水煮沸30分钟，捞起用4层纱布过滤取汁。然后称取琼脂20克，用剪刀剪碎后加入马铃薯汁液内，继续加热，并用竹筷不断搅拌使琼脂全部溶化，再加足水l000毫升。然后加入葡萄糖，稍煮几分钟后，用4层纱面过滤1次，取其液汁。
（2）趁热分装入管装量为试管长度的2／5，随之塞上棉塞，立放于试管笼上。分装时应注意不要使培养基粘在试管口和试管壁上，以免发生杂菌感染。
（3）及时高压灭菌灭菌目的是杀死培养基内所有微生物，使之处于无菌状态。灭菌时将试管每10支扎成一捆，棉塞一端用牛皮纸包好，垂直放入高压锅内进行灭菌。在1.176×10。帕（1.20千克／厘米。）的压力下保持30分钟左右，待压力表白动降到“0”时，再打开锅盖，取出试管。
（4）趁热排斜试管取出后趁热斜靠在桌上的小木棒上，使管内培养液斜面上长度达2／3至3／4，冷却后即成固体斜面培养基。
（5）检测纯度灭菌后的效果如何，需要进行认真检测。可从每批试管中取出3～5支，移入恒温箱中，调整至28℃左右进行培养。经3～7天后，仍未发现有杂菌产生，即证明无杂菌，方可作为母种斜面培养基。
琼脂斜面培养基配制工艺流程如（图5）所示。