（1）接种箱必须放在清洁环境中使用。
（2）先开启玻璃窗，将箱内杂物清除干净，再用浓度为2％来苏儿或浓度为0.1％新洁尔灭或2％过氧乙酸，喷雾消毒。
（3）将待接种的培养基和所用工具放入接种箱左侧，接种后的培养基放在右侧，酒精灯等用品放在中间。
（4）用甲醛熏蒸20～30分钟后开始工作。接种箱内空间约1立方米，用小茶杯盛高锰酸钾5克，再用小烧杯盛福尔马林10毫升倒人盛有高锰酸钾的小茶杯中，产生甲醛蒸气，迅速盖好玻璃窗。或取气雾消毒盒中药粉5克倒入小茶杯中，用火柴点燃，密闭20分钟灭菌。
（5）用75％酒精棉球抹双手及母种试管或原种瓶外壁。试管和菌瓶的棉塞用火焰灼烧，取浸过消毒液的薄膜包妥。
（6）打开操作小门，将两手伸进操作孔，同时带进菌种，点燃酒精灯，进行接种无菌操作。
（7）将火柴梗、挖出的老菌皮等废弃物，先置于小茶杯（或小烧杯）内，待接种完毕再取出扔于纸篓。
（8）接种完毕，盖灭酒精灯，抽出手臂，打开玻璃窗，将已接好种的试管或菌瓶等贴好标签，送到培养箱或培养室培养。