无论自己分离的一级种，或是引进的一级种，都要进行扩大繁殖，以增加母种数量。银耳混合菌丝的试管一级种，每支一般只能扩接成2～4支。菌种转管次数太多，菌丝长期处于营养生长状态，常发生生长周期缩短，早出耳，子实体变小，片薄，朵4、，影响产量和品质。因此一级种转管扩接不宜多。一级种转管扩接操作方法如下：
用75％酒精棉球涂擦双手和菌种试管外壁：将菌种和斜面培养基的两支试管用大拇指和其他4指握在左手中呈水平位置：将棉塞用右手拧转松动：用右手小指、无名指和手掌拔掉棉塞，夹住，靠手腕的动作不断转动试管口，并通过火焰灼烧：将烧过的接种针伸入试管内，先接触无菌丝的培养基使其冷却；然后将接种针轻挑少许菌种，抽出试管，注意菌种块勿碰到管壁，迅速通过火焰上方移进另试管，置培养基中央：灼烧管口，并在火焰上方塞好棉塞。
接种整个过程应迅速、准确。最后将接好的试管贴上标签，送进培养箱（室）培养。