温度是草菇生长发育最重要的环境条件之一。草菇生长发育的不同阶段，对温度的要求也不同，同时对温度的反应相当敏感。
1）菌丝体生长对温度的要求。草菇是属于高温性的真菌，其菌丝体的生长要求较高的温度。菌丝可以生长的温度范围是10℃～43℃，生长适温为30℃～39℃，最适生长温度为35℃～36℃。但是低于15℃或高于42℃时，菌丝生长会受到强烈的抑制，5℃以下或45℃以上可导致菌丝死亡。
2）子实体分化时期对温度的要求。一般来说，草菇子实体分化的最适温度为28℃～30℃，低于20℃或高于35℃都不能形成子实体，而草菇孢子萌发的最适温度可高达40℃。
3）子实体发育时期对温度的要求。一般来说，子实体发育的最适温度要比菌丝体生长的最适温度低，但要比子实体分化时的最适温度要高些。值得注意的是，子实体对温差极其敏感，12小时料温变化若在5℃以上，特别是低温反季节栽培时，极易造成草菇大面积死亡，甚至绝收。