将菌种从一个斜面培养基接种至另一个斜面培养基上的方法,称为斜面接种法。其具体步骤如下:
(1)点燃酒精灯。将菌种和斜面培养基的两只试管平行放在左手上,用拇指与其他四指夹住,并使中指位于两试管之间,两试管的管口齐平。
(2)用右手先将棉塞拧转松动,并稍拉出一些,以利接种时拔出。
(3)右手持接种针,用酒精灯将针烧红。针头以上凡是接种时可能进入试管的部分,均应用火灼烧。
(4)用右手的小指与掌间拔掉左手上两只试管上的棉塞,同时迅速将试管口在酒精灯上烧灼3秒钟左右,使管口上可能沾染的少量杂菌烧死。
(5)将烧过的接种针伸入菌种管内,先将针头接触培养基上没有菌的部位(如斜面的顶端),使其冷却,以免烫死被接种的菌体。然后轻轻接触菌体,取出少许,慢慢将接种针抽出试管,接种针抽出时不要使针头部分碰到管壁和管口。取出后,不可使针头通过火焰,更不可触及其他无关物品或桌面。
(6)迅速将接种针伸进另一试管,在培养基上轻轻划线,接种菌体于其上。划线时,要由底部起划较密的平行线,一直划到顶部,以充分利用斜面面积,但不要将培养基划破。
(7)烧灼试管口,将棉塞塞上。塞棉塞时,不要移动试管迎接棉塞,以免试管在移动中纳入可能含菌的空气。
(8)将针头在火焰上烧灼灭菌。放回原处后,腾出手将棉塞塞紧。