不久，阿尔弗雷德在实验中注意到：他最初发明的那种以黑色火药为填料的引爆装置，虽然可以与安全炸药配合使用，但其效果并不十分理想，因为引爆装置的爆炸力太小，威力还不够大，况且引爆装置有时也会失效。于是他又着手进行新的试验，打算研究出新的引爆装置。
在诺贝尔发明新的引爆装置之前的四十多年，德国著名化学家李比希就已发现了雷酸。李比希和德国另一位著名化学家维勒分别发现，雷酸的盐类具有猛烈的爆炸性。在雷酸的各种盐类中，又以雷酸汞的爆炸特性最为突出。同黑色火药相比，雷酸汞的爆炸力要大得多；同硝化甘油相比，雷酸汞的敏感性又要小得多。
阿尔弗雷德分析了雷酸汞的特性，想到能否把雷酸汞做填料发明一种新的引爆装置。为安全起见，他曾以雷酸汞和黑色火药的混合物做填料，但实验效果不理想。到1867年他完全改用雷酸汞做填料。失败了几百次后，又试验了几百次。意想不到的是，成功与灾祸竟同时来到！“轰”的一声巨响，阿尔弗雷德的实验室在一次试验中被炸上了天，他自己被炸得鲜血淋漓。然而，浑身是血的阿尔弗雷德从瓦砾堆中爬出来后却高兴得热泪盈眶。因为他以高昂的代价，取得有价值的经验。此后，阿尔弗雷德在一个金属管的底部装入硝化甘油和黑色火药的混合物，而上部装入雷酸汞及导火线。
当导火线点燃，燃性极好的雷酸汞会引起底部混合物的快速爆炸。雷管就这样被发明出来了。最初他用铅管封装雷酸汞，后用铜管，现在这种引爆管仍在普遍地应用。
19世纪60年代初期的瑞典，正处于繁忙的铁路建设时期地势，急需一种威力大、见效快的爆炸方法，来征服坚硬的原始岩石，在地势起伏不平的农村修建运输线。
诺贝尔成功地将硝化甘油从一种任性状态的化学物品，变为人类可以控制的化学物品。通过多次的试验，这位年轻的发明家深信爆炸甘油是一种取得进步的源泉，它的市场前景也是非常乐观的。
他并没有因为赫伦内堡灾难而丧失勇气或者束缚手脚。也没有为了个人的幸福，而去听从某些人的一些好意劝告，例如“尽快远离发明这个讨厌的事业，因为它只能带来许多灾祸”等等诸如此类的话。没有任何东西能阻挡他前进的步伐。他的主要愿望是，恢复被破坏了的家庭企业，使带有附属雷管的爆炸油进入市场，并且赢得公众对它的信任。
1864年10月，在他重新进行了几次大胆的示范表演之后，国家铁路建设局对用他的办法制造出来的硝化甘油表示信任，认为它在爆炸力方面，远远超过了普通的黑色炸药。
硝化甘油被正式批准使用，并被用于在斯德哥尔摩进行的隧道爆炸工程。
进行大规模的工厂生产时，公众对他的冒险行动持敌对态度，使他一时找不到厂房和场地。没有人肯与他为邻，而且，人们还可以找到已公布的法令作为反对他的理由。很长时间内诺贝尔只能在梅拉尔湖面一只带有棚盖的驳船上，利用最简单的仪器，以每磅产品价值两个半瑞典克朗的成本，制造“诺贝尔专利爆炸油”。
斯密特在斯德哥尔摩的工商界里是一个出人头地又见多识广的人。1864年10月，诺贝尔同他的父亲、斯密特和其他人一道，建立了世界上第一家硝化甘油有限公司。开张时的资本为十二万五千克朗，其中流动资金有两万五千克朗。年轻的诺贝尔不仅是这家公司的经理，而且还要负责工程、往来通讯、旅行、广告和财务工作。第二年，这家硝化甘油有限公司在经过很多挫折之后，终于得到在温特维肯的荒郊建厂的许可。此后五十多年间，这座工厂随着生产能力的不断扩大，一直提供各种诺贝尔爆炸物和炸药。
诺贝尔有一位保持着终身友谊的朋友——阿拉里克·利德伯克工程师（1834～1912）。诺贝尔聘请他来同自己一起建厂、造机器。他们之间富有成果的合作就是从这里开始的。
后来，他们又一起在世界其他地方，建立了很多重要工厂，并且在这个未被开垦的领域里，合伙建造了一些新的仪器，并发展了某些新的生产方法。
诺贝尔不知疲倦地四处奔走，到采石场和矿山等未来的卖主那里，去表演他的爆炸程序。为了做广告推销公司的产品，他在那些日子里还做了一件不平常的事情：邮寄散发详细的使用说明书。尽管由于使用者的疏忽，有时也出现一些安全事故，但是，大矿业公司和国家隧道工程使用的结果是成功的，大大节省了时间和劳动力，从而增加了人们对硝化甘油和这种革命性雷管的普遍兴趣。矿务界和技术刊物，现在都以尊重的态度对此进行讨论，国外也来信询问。硝化甘油帮助美国打通了内华达山脉，缩短了中太平洋铁路的建造时间，解决了当时最大的工程难题。在黄色炸药发明专利权出现之前，这家铁路公司长期使用着液体的硝化甘油，事实上他们除此之外，就从来没有用过黄色炸药。
诺贝尔关于硝化甘油能够引爆的发现，给这家公司节省了几百万美元。