【实验目的与要求】
1.了解消化管的基本微细结构。
2.熟悉食管的微细结构，掌握胃、小肠的微细结构。
3.掌握肝和胰的微细结构。
【实验材料】
1.食管切片。
2.胃底切片。
3.小肠切片。
4.结肠切片。
5.肝切片。
6.胰切片。
【实验内容与方法】
一、示教
1.结肠黏膜：结肠切片（HE染色）。
2.中央乳糜管：空肠切片（HE染色）。
3.胆小管：肝切片（银染）。
二、观察
（一）食管（食管横切片，HE染色）1.肉眼观察：管壁近腔面染成紫蓝色的部分为黏膜，由黏膜向外，浅红色的部分为黏膜下层，染成红色的为肌层，外膜不易区别。
2.低倍观察：从腔面逐渐向外，观察管壁的各层结构特点。
（1）黏膜：①上皮：较厚，在管壁的最内层，为复层扁平上皮（详见复层扁平上皮）；②固有层：位于上皮的外周，为染色较浅的疏松结缔组织，内含小血管等；③黏膜肌层：较发达，为纵行平滑肌，在切片上呈横断面。
（2）黏膜下层：为染色较浅的疏松结缔组织，内含食管腺、较大的血管和神经。
（3）肌层：分为内环行、外纵行两层。注意为哪种肌组织组成，以确定食管取材部位。
（4）外膜：为纤维膜，由疏松结缔组织构成。
3.高倍观察：食管腺以灰蓝色团块的黏液性腺泡为主，偶可见混合性腺泡。
（二）胃（胃底切片，HE染色）
1.肉眼观察：表面染成紫蓝色的部分为黏膜，深部染成淡红色是黏膜下层，其外深红色是肌层，外膜不明显。
2.低倍观察：分辨胃壁的四层结构，重点观察黏膜。
（1）黏膜：较厚，表面的凹陷是胃小凹。黏膜上皮为单层柱状上皮，上皮细胞染色淡，细胞界限清晰。固有层内含有大量排列紧密的管状胃底腺，切片中的断面可呈管状、圆形或不规则形等；腺体顶部染色偏红色，以壁细胞为主，底部染色偏蓝色，以主细胞为主；结缔组织较少。黏膜肌层较薄，由内环行、外纵行两层平滑肌组成，紧贴胃底腺深面。
（2）黏膜下层：为染色较浅的疏松结缔组织，内有血管和神经。
（3）肌层：较厚，由内斜、中环、外纵三层平滑肌构成，呈深红色，其层次不易分清。
（4）外膜：为浆膜，是一层很薄的结缔组织，外有间皮覆盖。
3.高倍观察：选一外形完整的纵切胃底腺，仔细观察其结构，辨认主细胞和壁细胞。
（1）主细胞：数量较多。细胞呈柱状，细胞核圆形，位于细胞的基底部，细胞质呈淡蓝色。
（2）壁细胞：细胞较大，呈圆形或锥体形，圆形的细胞核位于细胞中央，细胞质染成红色。
（三）胰（胰切片，HE染色）
1.肉眼观察：呈紫蓝色片状，内可见含导管的结缔组织将实质分成许多小叶。
2.低倍观察：小叶外分泌部主要由大量腺泡构成；胰岛为腺泡间染色较淡的细胞团，大小不等。结缔组织内含有导管和血管。
3.高倍观察：
（1）腺泡：为浆液性腺泡，由单层锥体形细胞构成，界线不清，细胞顶部为深红色，其底部呈蓝紫色。细胞核呈圆形，位于细胞的基底部。
（2）导管：由单层上皮构成，多位于结缔组织内。
（3）胰岛：细胞染色浅淡，界线不清，细胞排列不规则，内有丰富的毛细血管。
三、观察并绘图
（一）空肠（空肠横切片，HE染色）
1.肉眼观察：内表面凹凸不平染成淡紫蓝色的是黏膜，向外依次是黏膜下层、肌层和外膜。
2.低倍观察：分辨肠壁的四层结构，重点观察黏膜。
（1）黏膜：表面细小的指状突起为肠绒毛，此为小肠的特征性结构。在切片中肠绒毛呈纵、横、斜切面，形状不规则。深部的固有层内可见切成不同断面的肠腺。肠腺属管状腺，开口于相邻肠绒毛的根部之间。固有层的外周为黏膜肌层。
（2）黏膜下层：为疏松结缔组织，含有小血管、神经等。
（3）肌层：为平滑肌，分两层，内层环行，外层纵行。
（4）外膜：为浆膜。
3.高倍观察：选择一条清晰、典型的肠绒毛纵切面观察。
（1）肠绒毛：浅层为单层柱状上皮，上皮细胞游离面可见带状红色的纹状缘。吸收细胞之间夹有许多呈空泡状的杯形细胞；肠绒毛的中轴由结缔组织构成，内含毛细血管和平滑肌纤维；在肠绒毛中央可见一较大而不规则的管腔，管壁由内皮构成，为中央乳糜管，有的呈闭合状态，不易辨认。
（2）肠腺：上皮与绒毛上皮相似，在腺开口处与肠绒毛的上皮相延续；底部可见潘氏细胞，胞体呈锥体形，核圆形近基底部，特殊染色时核上方有嗜酸性颗粒。
高倍镜下绘一个完整肠绒毛，注明单层柱状上皮、固有层、杯形细胞、纹状缘、中央乳糜管等。
（二）肝（肝切片，HE染色）
1.肉眼观察：红色片状，其中可见大小不等的肝内血管断面。
2.低倍观察：肝组织被结缔组织分隔成许多多边形的肝小叶（人肝的小叶间结缔组织很少，肝小叶界限不清楚；猪肝的肝小叶周围结缔组织较多，界限明显）。典型的中央静脉是肝小叶中央的不规则腔隙（不一定每个肝小叶都切到）。中央静脉周围呈放射状排列的细胞索是肝板的断面，肝板之间的腔隙为肝血窦。数个相邻肝小叶之间，结缔组织较多，内含有三种不同结构的管腔，此即肝门管区。
3.高倍观察：选择典型的肝小叶和肝门管区观察。
（1）肝小叶：
中央静脉：肝小叶中央的腔隙，管壁不完整，与肝血窦相通，有的腔内可见红细胞、肝巨噬细胞。
肝板：由肝细胞构成，呈索条状。肝细胞的体积较大，呈多边形；胞质呈红色；细胞核圆形，位于细胞的中央，核仁明显；多数肝细胞为一个核，有时可见到两个核。
肝血窦：为肝板之间的不规则腔隙。窦壁的内皮细胞与肝细胞紧贴，核扁而小，染色较深。
（2）肝门管区：有三种管腔。
小叶间胆管：管腔小；管壁由单层立方上皮构成，细胞核圆形，排列整齐，染成紫蓝色。
小叶间动脉；管腔小而圆；管壁厚，有少量环行平滑肌，染成红色。
小叶间静脉：管腔大而不规则；管壁薄，着色较浅。
在低倍镜下绘肝小叶和肝门管区图，注明中央静脉、肝索、肝血窦、小叶间胆管、小叶间动脉和小叶间静脉。
（徐忠勇、朱祖明）