鸡腿菇栽培原料包括草料、粪肥、氮源辅料和矿质肥料四大类。其中草料和粪肥的用量最大，约占培养料总量的70％～95％，是鸡腿菇生长发育的主要营养来源，故称之为主料；而氮源辅料和矿质肥料的用量相对较少，称为辅料。主料绝大多数是农业生产中的下脚料，如麦秸、玉米秸、稻草、猪粪、牛粪等，国内各地栽培鸡腿菇所用主料不完全相同，都是因地制宜就地取材，充分选用当地来源最广、数量最多、价格低廉和营养丰富的原料。
（1）常用草料的选用。草料是鸡腿菇生长时碳素的最主要来源，其来源十分广泛，最常用的是麦秸和稻草，此外还有玉米秸、玉米穗轴、高粱秸、高粱壳、棉籽壳、豆秸、甘薯藤、甘薯渣、花生藤、花生壳、锯木屑、酒糟、沼气渣、甘蔗渣、甜菜渣、废棉、各种干草、畜棚禽舍内的垫草（厩肥）以及各种食用菌出菇后的废料（废菌糠）等。无论选用何种原料，都应选择干燥无霉变的，凡发霉变质及茎秆软烂虫蛀的草料，均不能作堆料。
①稻草以糯稻草和杂交稻草为最好，其次是常规稻的晚（粳）稻草；早（籼）稻草秸秆矮软，发热后极易腐熟，影响堆料的通气性，一般较少采用。稻草可单独堆料，也可与麦秸混合使用。
②麦秸茎秆较硬，蜡质层厚，吸水差，腐熟速度较慢，但通气性能好。麦秸中以大麦秸最易腐熟，其余依次是元麦秸、小麦秸、黑麦秸和燕麦秸。麦秸的质地较硬，使用前最好用农用机械进行处理，以使茎秆破裂变形变软，从而有助于吸湿和发酵。
在利用不同种类的作物茎秆配制堆料时，应将较硬的、较难发酵的草料，先用部分粪肥堆制发酵1周左右，再加入易发酵的草料，这样可促使发酵均匀。
草料类应在平时及早收集，晒干后贮藏于通风干燥场所，防止受潮霉变，以保持其优良质地和产热效能。
（2）常用粪肥的选用。粪肥是鸡腿菇生长时氮素的最主要来源，其种类很多，马粪、牛粪、猪粪、鸡粪以及人粪尿是鸡腿菇栽培时的常用粪肥。
①马粪性热，有机质丰富，质地疏松，保温、保水性能强，通气性好，与作物秸秆一起堆制发酵，发热力强，腐熟好，是最理想的粪肥。用新鲜马粪建堆容易发热，高温持续时间长，最好加些马尿。北方地区马粪资源较多，平时应注意收集贮存备用。
②牛粪性冷，养分多，肥效长。用其栽培鸡腿菇，出菇较稀，但菇质好，后劲足。牛粪中以黄牛粪肥效最好，奶牛粪次之，水牛粪最差。牛粪质粘，湿粪发热量低，宜晒干敲碎后使用。
如采用湿粪堆料，必须捣成稀糊状再用，否则易形成粪块，造成堆料发酵不良，堆温升不高或升温不均匀。
③猪粪性冷，营养成分好，氮、磷、钾含量都较高，其中速效氮含量特别高，为速效性粪肥。用猪粪栽培鸡腿菇，出菇快而密，但菇形较小，菇质欠佳，菌丝体易早衰，且前期产量高，后期产量低。猪粪透气性较差，堆料要搭配麦秸，并适量增加含氮辅料。生产上采用猪牛粪混合堆料，能使鸡腿菇前后期产量较为均衡。
④禽粪中养分含量以鸡粪最高，鸭粪、鹅粪次之。禽粪的营养成分较齐全，氮素含量高，堆料发热快，温度高，但碱性强，黏性大，特别是单独使用鸡粪，易使鸡腿菇菌床和子实体染病。生产上常用禽粪与猪、牛粪混合使用，效果更好。
⑤人粪尿是一种含有氮、磷、钾等多种养分的速效肥料，猪、牛粪来源不足的地区，可采用人粪尿来代替部分粪肥用量，效果也很好。生产上常用人粪尿来预湿建堆前的草料、粪肥，或在建堆时和翻堆初期用人粪尿来补充堆料的水分和养分，以提高堆料发酵的质量。
鸡腿菇常用粪肥除单一使用外，也可混合使用，且混合粪肥常优于单一粪肥。据测定，马粪含磷较高，猪粪含钾较多，牛粪则含钙丰富，粪肥混合使用时，可使培养料营养成分更为全面充足，更有利于鸡腿菇的生长。
粪肥需常年随时收集，经晒干捣碎、拣净杂物后贮存于干燥的环境中。粪肥也可采用湿粪贮存，方法是事先选好高地挖好粪塘，再将随时收集的湿粪倒入粪塘内做堆、拍紧，并用薄膜、草苫盖好，防止雨淋。粪塘周围要开好排水沟，避免雨水淹浸使肥效流失。湿粪使用时可按4∶1折成干粪。
（3）氮源辅料的选用。堆制发酵时一般要加入氮源辅料，目的是调节培养料的碳氮比，满足鸡腿菇营养需要。氮源辅料主要有饼肥和氮素化肥两大类。
①饼肥是一类含氮量高、营养丰富的有机物质，常用的是豆饼、菜籽饼、花生饼、棉籽饼、芝麻饼等。用量一船占堆料总量的3％～5％。此外，还常用麦麸、米糠、玉米粉、血粉、啤酒糟等来代替饼肥，但用量要增加，一般占培养料的10％~20％，上述辅料的具体用量要根据粪草质量及其碳氮比来确定。通常粪肥少或无粪肥的堆料，饼肥及麸皮的用量要相应增加。这类有机氮素辅料有利于提高堆料的质量，促进鸡腿菇菌丝生长，可有效地提高鸡腿菇的产量和质量。
②氮素化肥以铵态氮肥为主，常用的有尿素、硫酸铵、碳酸氢铵、农用氨水、硝酸铵、氯化铵等。这些可溶性的速效氮肥，是调节堆料碳氮比、促进料内微生物活动和繁殖、提高堆料发酵质量不可缺少的营养物质。不同氮素化肥最好能搭配使用，具体用量应视粪草和饼肥的碳氮比严格掌握。以尿素为例，其用量一般占堆料干重的0．5％~2％，粪肥及饼肥用量多时要少加，合成料内要多加。氮素化肥应在建堆时1次加入，或在建堆和第一次翻堆时分两次加完，用量过多或加入过迟，堆内会产生大量的氨气，造成培养料碱化过重，抑制鸡腿菇菌丝生长，甚至不能定植。另外，氮素化肥易吸湿结块，应存放低温干燥处密封贮藏，最好是随用随买。
（4）矿质肥料的选用。添加矿质肥料的目的是补充矿质元素，调节氮、磷、钾的比例，改善培养料的理化性状。矿质肥料主要有磷肥和钙肥两类。
①磷肥常用的有过磷酸钙和钙镁磷复合肥，它可补充培养料中磷素、钙素等的不足，防止铵态氮的逸散，促进微生物的分解活动，改善培养料的理化状况。磷肥的用量一般为堆料干重的0．5％～2％，不宜过多，否则易使培养料酸化。
②钙肥常用的是碳酸钙（石灰石粉）、石灰、硫酸钙（石膏）等。钙肥可使秸秆脱脂软化，改善培养料的通气性状，促进微生物的繁殖活动，提高培养料的持水力和保肥力，防止堆料酸化，保持其酸碱度平衡。同时也给鸡腿菇生长提供矿质营养。钙肥用量一般为堆料干重的1％～3％。
上述矿质肥料通常在建堆时一次加入，也可在建堆和第一次翻堆时分两次加入。