待袋(瓶)料温度降至25℃左右时即可接种。接种时,必须严格按照无菌操作程序进行。把灭菌冷却后的栽培袋(瓶)连同接种工具搬入接种箱,同时将已检查过无污染、菌丝生长健壮的原种瓶表面用75%酒精擦拭,或用0.1%高锰酸钾溶液浸洗,以杀死杂菌,然后放入接种箱。接种箱消毒一般以甲醛高锰酸钾熏蒸,每立方米空间用甲醛8~10毫升,高锰酸钾4~5克。先将高锰酸钾放入玻璃杯或搪瓷钵,后加进甲醛溶液(容器的容积大小,以两种药物反应后沸腾液不外溢为准),使之产生甲醛气体。同时打开紫外线灯消毒半小时,即可开始接种。接种人员在接种操作室应穿上干净的工作服,手用肥皂洗干净,再用75%酒精擦拭消毒。
接种时先点燃酒精灯,一只手把用75%酒精浸过的长柄镊子在酒精灯火焰上烧过灭菌,另一只手将原种瓶棉塞打开,把棉塞放在酒精棉球上,瓶口在火焰上烧过,以杀死附有的杂菌。用无菌镊子剔去菌种表面的老菌块,并把菌种捏碎,在酒精灯的无菌区内打开料袋的扎口,均匀接入原种,最后用棉塞或塑料绳把袋口扎好。接种量以每瓶原种接30~35袋为宜。接种动作力求迅速准确,尽量减少和缩短瓶口、袋口暴露于空间的时间,防止杂菌侵入。
栽培种的培养过程与原种相同。在培养过程中,要防止塑料袋被硬物刺破,应经常检查杂菌污染和鼠害(塑料袋培养料一旦被咬破,杂菌孳生,会影响制种产品率)情况。