腺垂体激素的产生和排泌受到下丘脑激素的双重或促分泌调节，维持下丘脑垂体靶腺轴的功能正常。当下丘脑垂体本身疾病引起腺垂体功能减退时，可通过给予外源性下丘脑促垂体激素来兴奋腺垂体细胞，观察其反应程度来判断腺垂体的储备功能状态。此外，在一定程度上尚可鉴别下丘脑性或是垂体本身原因引起的腺垂体功能减退。这种联合兴奋试验常用于垂体外科手术治疗和放疗后腺垂体功能状态的评估，以决定是否需要替代治疗。
适应证
1.判断腺垂体的储备功能状态。在一定程度上尚可鉴别下丘脑性或是垂体本身原因引起的腺垂体功能减退。
2.常用于垂体外科手术治疗和放疗后腺垂体功能状态的评估，以决定是否需要替代治疗。
禁忌证
无明确禁忌证。
检查前准备
1.受试者必须于清晨抽血，保持醒后安静状态下进行试验。
2.注意单独作CRH兴奋试验时应在下午4时以后进行，试验前至少4小时不能进食。
3.注药后，有些患者可有轻度面部发红，肠鸣音亢进及血压轻度下降，一般不会有其他严重不良反应发生。
4.TRH兴奋试验亦不受碘剂的影响，但雌激素、茶碱、ATD等可强化垂体对TRH的反应，而皮质醇、TH制剂、左旋多巴可抑制垂体对TRH的反应，故试验前应停用上述药物至少2周。
检查步骤
相继静脉注射(GnRH、TRH、CRH和GHRH）每种激素均溶于5ml生理盐水中，依次在20~30秒内推完。其剂量分别为：GnRH100毺g，TRH200毺g，CRH以及GHRH均为1毺g/kg。分别在-30、0、15、30、60、90以及120分钟抽血检测ACTH、皮质醇、TSH、LH、FSH及GH水平。
临床价值
联合兴奋试验用于评估垂体手术或放射治疗后垂体内分泌功能恢复或破坏的程度。各种下丘脑激素兴奋试验也可单独作用，用于鉴别下丘脑性或垂体性某一靶腺功能减退。
1.TRH兴奋试验正常人注射TRH后30分钟血清TSH出现高峰值，可达10~30mU/L。如静脉注射TRH后TSH无明显升高，称为无反应；若血清TSH峰值在60分钟或以后出现称为延迟反应。无反应常见于Graves病及继发于垂体疾病的甲状腺功能减退症，延迟反应见于继发于下丘脑疾病的甲状腺功能减退症。
2.GnRH兴奋试验青春期前正常人LH分泌的兴奋反应程度很小，而FSH的分泌则可增加0.5~2倍。正常男性成人LH可增加4~10倍，FSH仅增加0.5~2倍。正常女性成人LH在卵泡期增加3~4倍，排卵前期增加3~5倍，黄体期增加8~10倍；FSH可增加0.5~2倍，与月经周期无关。
如垂体的LH/FSH储备功能减退，则兴奋反应程度达不到以上的正常倍数。因长期GnRH缺乏可引起垂体对GnRH的敏感性下降(垂体惰性），故单剂GnRH兴奋试验常不能鉴别下丘脑性或垂体性性腺功能减退，必须作静脉滴注GnRH兴奋试验(250毺g静脉滴注8小时）。
正常反应：静脉滴注后30~45分钟LH上升(第一次上升反应），60~90分钟下降，在2~4小时内LH出现第二次上升，可维持4小时。
结果判断：垂体本身疾病引起LH/FSH储备功能完全缺乏者无反应；LH/FSH储备功能部分缺陷者则第一次上升反应存在，第二次上升反应消失。下丘脑病变者无第一次上升反应，可见有第二次上升反应(称为延迟反应）。
有些因长期下丘脑病变而致垂体严重惰性病例，对GnRH静脉滴注8小时也不出现延迟反应。如不进行延长GnRH兴奋试验则会误诊为垂体疾病引起的LH/FSH储备功能减退。延长GnRH兴奋试验方法：每日肌内注射GnRH400毺g，共5日，或每日静脉滴注GnRH250毺g(8小时滴完），连续3日。如给药后出现LH分泌反应，则提示下丘脑病变。建议在单独进行垂体LH/FSH储备功能检查时，最好进行延长GnRH兴奋试验结果较为可靠。
3.CRH兴奋试验正常人血浆ACTH峰值比基值增加2~4倍，峰值一般出现于注药后10~15分钟，可达4.4~22pmol/L(20~100pg/ml），皮质醇于注药后30~60分钟可升至550~690nmol/L。
如无ACTH和皮质醇的兴奋性反应或反应很弱，提示垂体ACTH储备功能不足，见于病变在垂体的腺垂体功能减退症。另外，大部分异位ACTH综合征和肾上腺肿瘤所致的库欣综合征患者由于增多的皮质醇负反馈抑制ACTH分泌的作用增强也可见无反应或兴奋反应较弱。
如ACTH反应呈持续性升高，正常峰值消失，见于病变在下丘脑的腺垂体功能减退症。Nelson综合征患者对于CRH刺激可有显着增强的ACTH分泌反应。垂体ACTH瘤患者可出现过度反应也可为正常反应。
因此，CRH兴奋试验对库欣综合征的病因诊断价值有限，库欣综合征的病因诊断有赖于ACTH检测技术的提高和细致的垂体或肾上腺的影像学检查。如单独进行CRH兴奋试验主要用来鉴别继发性肾上腺皮质功能减退症的病因是垂体性或是下丘脑性。
4.GHRH兴奋试验正常人注射GHRH后GH分泌的峰值大于7毺g/L。如试验结果峰值<5毺g/L，则需排除垂体惰性后方可诊断为垂体本身病变导致的GH缺乏。方法为于每晚7~8时皮下注射GHRH(1毺g/kg），连续7日，第8日晚深睡时(即入睡后半小时）抽血测GH。如其值大于7毺g/L，称为延迟反应，提示病变在下丘脑，否则考虑为垂体疾患引起的GH缺乏。
二、促肾上腺皮质激素兴奋试验
利用外源性促肾上腺皮质激素(ACTH）对肾上腺皮质的兴奋作用，从尿和血中肾上腺皮质激素及其代谢产物的变化以及外周血中嗜酸性细胞计数降低的程度来判定肾上腺皮质的最大反应能力(储备功能）。
适应证
1.用于判断肾上腺皮质功能不全。
2.可鉴别肾上腺皮质功能减退的病因，可将原发性肾上腺皮质功能减退与正常者分开；也可将原发性与继发性ACI分开。
3.对较长期用GC治疗者，可用ACTH兴奋试验估计肾上腺皮质受抑制的程度。
4.ACTH刺激试验还可用于女性多毛的病因鉴别。
禁忌证
怀疑有垂体损伤者不宜做此试验。
检查前准备
肾上腺皮质功能明显减退者做此试验有可能诱发急性肾上腺皮质危象，在试验前和试验当时应口服小剂量地塞米松，使试验安全。
检查步骤
本试验有多种方法(如肌内注射法、一次快速静脉注射法、静脉滴注法等），ACTH的剂量、品种及试验时间的长短亦各异。目前应用较多的是ACTH1~24，其不良反应较小，用量低。
1.传统的方法是连续留4日24小时尿，测定尿17OHCS、17KS(也可观察皮质醇）。第1、2日只留尿作为空白对照。第3、4日留24小时尿，并于晨8时取血作嗜酸性细胞计数。
2.传统的标准方法是用ACTH25U(0.125mg）稀释于5%葡萄糖液500ml中(如为艾迪生病，可用5%葡萄糖盐液或生理盐水稀释），持续静脉滴注，于8小时内滴完。长期ACTH静脉滴注试验最常用的改良法是持续48小时静脉滴注法。每12小时静脉滴注ACTH40U(于500ml液体中），共48小时。
3.滴完后，再做嗜酸性细胞计数。
临床价值1.肾上腺皮质功能正常者在静脉滴注ACTH后，每日尿中17OHCS应较对照增加8~16mg(增加1~2倍），尿17KS增加4~8mg，血皮质醇呈进行性增高，尿游离皮质醇增加2~5倍，而嗜酸性细胞减少80%~90%。
2.肾上腺皮质增生者往往呈过度反应，尿17OHCS，17KS均增加2倍以上，由于大剂量ACTH易造成肾上腺出血，目前已不常用。
3.肾上腺皮质腺瘤者的尿17OHCS、17KS排出量正常或稍增加，因肾上腺皮质贮备能力差，滴注ACTH当日常增加不明显。
4.肾上腺皮质癌者往往无反应，尿17OHCS及17KS无显着变化(自主性分泌）。
5.肾上腺皮质功能减退症患者的尿17OHCS基础值正常或稍偏低，静脉滴注ACTH后，17OHCS不增多，嗜酸性细胞无明显下降，说明其肾上腺皮质分泌功能已达极限。
三、美替拉酮试验
美替拉酮试验用于估计HPA轴功能的完整性，在不能测定ACTH的情况下，用于估计垂体的储备功能。
适应证
1.用于估计下丘脑垂体肾上腺轴功能的完整性。
2.在不能测定ACTH的情况下，用于估计垂体的储备功能。
禁忌证
禁用于身体衰弱、肾上腺皮质功能不全、应用糖皮质激素治疗者。
检查前准备
无特殊准备。
检查步骤
经典的标准美替拉酮试验是于24小时内每4小时口服美替拉酮750mg，以后有许多改良方法。目前一般用500mg，每6小时口服1次，共4次。如用血皮质醇作指标，其方法是于第1日上午8时测血浆皮质醇，然后按常规服4次美替拉酮，第2日上午8时再测血皮质醇，正常人应降低到基础值的1/3以下。如用静脉法给药，先留2次24小时尿测尿17OHCS及17KS作对照，第3日将美替拉酮30mg/kg加入生理盐水500ml中避光静脉滴注4小时，静脉滴注当日及次日留尿测17OHCS及17KS。
临床价值
正常人在滴注或次日尿17OHCS较对照日至少增加6~7mg(可提高2~3倍）。
1.对照日尿17OHCS、17KS低于正常，试验日不升高者提示下丘脑分泌CRH和(或）垂体分泌ACTH功能减退。
2.如对照日尿17OHCS、17KS高于正常，试验日升高甚微或不升高提示垂体存在分泌ACTH的肿瘤，因肿瘤持续大量分泌ACTH，肾上腺已被ACTH过分刺激，因此不再有反应。或者由于某些肾上腺肿瘤不受ACTH的调控而无反应。如能测ACTH，前者升高，后者降低可资鉴别。
3.库欣综合征患者的尿17OHCS不受大剂量地塞米松抑制而对甲吡酮有反应提示其病因为增生，如患者对ACTH有反应而对美替拉酮无反应则提示为腺瘤。
4.正常人服药日尿17OHCS至少较基础值增加100%，血皮质醇降低至基础值的1/3以下。垂体功能减退及肾上腺皮质功能减退者均无反应，而库欣综合征(增生者）尿17OHCS明显增加，腺瘤者通常无反应。
四、口服葡萄糖耐量和胰岛素、C肽释放试验
口服葡萄糖耐量试验是通过口服一定剂量的葡萄糖，并检测服葡萄糖前后血糖水平来发现和明确诊断糖代谢异常的一种无创性检查手段。还可以在服葡萄糖前后同时检测胰岛素和C肽水平的变化，即胰岛素和C肽释放试验。
适应证
1.空腹血糖曒6.1mmol/L但<7.0mmol/L，和(或）餐后2小时血糖大于等于7.8mmol/L但<11.1mmol/L，和(或）无糖尿病典型症状者随机血糖曒11.1mmol/L一次。
2.高血压、脂代谢异常、肥胖者，或生产过巨大儿的妇女。
3.发生慢性心脑血管疾病但血糖未达到糖尿病诊断标准者。发生急性心脑血管意外者须待病情稳定后进行。
4.确诊糖尿病患者应每年进行一次口服葡萄糖耐量和胰岛素、C肽释放试验复查。
禁忌证
1.糖尿病酮症酸中毒、高渗性非酮症糖尿病昏迷者。
2.心脑血管意外急性期。
3.急腹症，或罹患其他疾病不宜大量饮水者。
4.心功能不良，或身体虚弱者须慎重。
5.空腹血糖曒13.9mmol/L者须慎重。
检查前准备
1.未诊断糖尿病者在进行检查前2~3日应正常进食和活动。
2.确诊糖尿病患者在检查前一日须停用长效口服药物和胰岛素，检查当日晨禁用一切降糖药物或胰岛素。
3.检查前应至少禁食10小时，但不限制饮水。
4.检查前应检测空腹血糖水平，必要时应检测糖化血红蛋白HbA1c。
检查步骤
通常于空腹抽取静脉血一次，后将无水葡萄糖75g溶于250~300ml水中，5分钟内喝完，于服糖后30、60、120、180分钟各取静脉血一次，分别检测血葡萄糖、胰岛素和C肽水平。常用检测方法有放射免疫法、干化学法和化学发光法。根据检测值的绝对值、变化趋势、既往检查结果和患者病史、查体及其他项目检测结果综合评价，确定糖代谢异常的诊断、评估目前胰岛细胞功能、辅助选择治疗方案和判断预后。
临床价值近年来，各大糖尿病研究机构和WHO对口服葡萄糖耐量和胰岛素、C肽释放试验的可重复性和临床价值有所争议，导致不同版本的糖尿病诊治指南提出的该检查的适应证有所不同，甚至有的“指南暠不建议常规进行该检查。但实际工作中发现，大部分糖代谢异常者餐后血糖的升高早于空腹血糖，而且在血糖达到糖尿病诊断标准之前已经开始出现大血管并发症。
这就对早期检测血糖，特别是负荷后血糖提出了更高的要求。回顾2型糖尿病的发病过程不难发现，胰岛素抵抗的出现远早于糖尿病的诊断，空腹胰岛素、C肽水平的改变和糖负荷后胰岛素、C肽波动的特点可以提供更多糖代谢异常的征兆。
优点1.无创，耐受性良好，除血糖波动外罕有明显不良反应。
2.对人员、设备要求相对较低。
3.对糖尿病和糖尿病前期的诊断有决定意义。
4.对胰岛功能及其变化的评估有重要意义，复查结果可用于评估胰岛功能的改变。
五、胰高血糖素试验
胰高血糖素仅作用于肝磷酸化酶，对肌磷酸化酶无影响。正常人在空腹肌内注射胰高血糖素后，血糖升高。
适应证
胰岛素瘤者或其他低血糖症的鉴别诊断。
禁忌证
怀疑糖尿病者不宜做此试验，血压明显升高者不宜做此试验。
检查前准备
试验前一夜禁食水，空腹开始试验。
检查步骤
空腹肌内注射1mg胰高血糖素，于0、15、30、45、60、120分钟分别取血测血糖、胰岛素。
临床价值