（1）制作母种培养基的器皿，应使用铝锅或玻璃器皿而不能使用铜锅或铁锅，以免造成铁或铜过量而引起毒害作用。
（2）灭过菌的培养基，应及时使用，不宜保存过久，以免造成营养成分发生变化及孳生杂菌。
（3）母种制作时要严格遵守无菌操作规程，即使接种操作的环境（如接种箱或接种室内的空间）、使用的器皿和工具、培养基等，以及操作人员的衣着和双手，都必须严格灭菌消毒。同时做好接种登记，写好标签（菌种名称、接种口期及转管次数），特别是同一时间转接几种不同的菌种时，要严防混杂。
（4）母种转管次数不能过多，一般以2～4次为好，否则会导致遗传性状变异，降低出菇率。
（5）冰箱或其他方法保存的母种在使用前，要认真检查标记，绝不能使用标记不清的母种，以防误用菌株而造成损失。
（6）为保证菌种成活、防止生长性状退化，培养基已干缩或接近干缩的母种不能使用。长期保存的母种，使用前应先活化复壮，如在冰箱中保存超过3个月，为提高接种成功率和萌发速度，应转管培养后再用。
（7）使用母种前，要认真检查是否有杂菌感染，被污染的母种绝不能用于扩大生产，否则所有工作将前功尽弃。
（8）接种后不萌动或生长不良的原因分析。①所用母种菌龄过老，菌丝活力衰弱。②接种操作不当引起：接种块被接种工具、酒精灯火焰烫死；所接菌丝块没有贴紧培养基，菌丝萌发后缺乏营养致死；接种块太薄太小干燥致死。③培养基配制不当引起：少加营养或酸碱度不适宜。④母种培养基过干，菌丝无法活化。