滑菇袋栽如果两头出菇则两头接种，如果侧面出菇则打孔接种。
栽培袋在温度降到20℃或室温时，搬进接种箱室内进行接种。同时把滑菇菌种连同接种工具一起放进接种室箱内，先用2％～3％来苏儿喷雾消毒，再按每立方米空间10毫升甲醛和7克高锰酸钾熏蒸半小时。接种前，工作人员要穿白色工作服，将双手和用具用酒精棉球擦拭消毒，然后将菌种瓶放在接种架上，正好处于酒精灯火焰的上方，揭去菌种瓶封盖，用接种勺将表面老化菌丝去掉约0BF.BFQ5厘米厚，随后将瓶内菌种捣碎。接种操作时两人配合进行，一人手托料袋，在酒精灯火焰上方的无菌区内拔掉棉塞，另一人挖一勺菌种迅速送入袋口，重新塞上棉塞。直到接种完毕，操作人员方可离开接种室，中途不得进出无菌室。接种操作见图10。接完所有栽培袋后，把栽培袋搬进培养室内培养。