【实验目的与要求】
1.了解结缔组织的特点和分类。
2.掌握疏松结缔组织的基本组成和结构特点。
3.了解软骨组织、骨骀骁铍骀禳?密质的结构和特点?
4.掌握各种血细胞和血小板的结构特点。
【实验材料】
1.腱切片。
2.疏松结缔组织铺片。
3.结缔组织切片。
4.脂肪切片。
5.网状组织切片。
6.气管横切片。
7.小肠切片。
8.耳廓切片。
9.骨磨片。
10.血涂片。
【实验内容与方法】
一、示教
1.致密结缔组织:腱切片(HE染色)。
2.脂肪组织:脂肪切片(HE染色)。
3.网状纤维:网状组织切片(银染法)。
4.弹性软骨:耳廓切片(HE染色)。
5.环骨板、骨单位、间骨板:骨磨片(HE染色)。
6.各种血细胞:血涂片(瑞氏染色)。
7.肥大细胞:结缔组织切片(特殊染色)。
二、观察
(一)透明软骨(气管横切片,HE染色)
1.肉眼观察:管壁中部染成紫蓝色的片状结构是透明软骨。
2.低倍观察:染成紫蓝色的是软骨组织的基质,其中散在的深色小点为软骨细胞;软骨细胞的周围有透亮区(软骨陷窝),这是制片时软骨细胞和软骨基质各自收缩所致的。软骨组织周围呈淡红色的部分是软骨膜,由致密结缔组织构成,与周围的结缔组织无明显分界。
3.高倍观察:软骨细胞的大小不等,常2~4个成群存在。在软骨的边缘部,软骨细胞比较小,呈扁椭圆形;靠近软骨的中央部,软骨细胞比较大,呈椭圆形或圆形。
(二)疏松结缔组织(小肠切片,HE染色)
1.肉眼观察:管壁分为三层,内、外两层染色较深;中层染色浅,由疏松结缔组织构成。
2.低倍观察:疏松结缔组织中纤维排列疏松,染色为粉红色,被切成各种断面。基质多未着色,细胞数量少,仅见染成蓝色的胞核。基质内有血管和神经丛。
3.高倍观察:①胶原纤维:粗细不均,方向不同,染成粉红色,呈带状、块状或点状断面。②弹性纤维:呈细丝状或点状结构,具有折光性。调节微调螺旋器,可见组织中有亮红色点状或细丝状的弹性纤维,但不易与胶原纤维区别。③成纤维细胞:镜下所见紫蓝色椭圆形胞核,主要为成纤维细胞核,由于胞质着色与纤维相近,故细胞轮廓不清。其他细胞较少,不易识别。
(三)血细胞(血涂片,瑞氏染色)
1.肉眼观察:呈紫红色片状,选择涂片薄和染色浅的部位进行观察。
2.低倍观察:在视野中,大量灰色小点是红细胞,散在的紫蓝色的小点是白细胞,在涂片边缘较多。注意两者在数量上的差别。
3.高倍观察:进一步观察红细胞和各类白细胞。
(1)红细胞:呈双凹圆盘状,无细胞核,染成淡红色,中央部染色较浅,边缘部染色较深。
(2)中性粒细胞:数量较多,比红细胞略大。细胞呈圆形;细胞质内含有细小、分布均匀的淡紫红色颗粒;细胞核呈杆状或分2~5叶,核叶之间有细丝相连。
(3)嗜酸性粒细胞:数量少,不易找到。细胞圆形;细胞质内含有粗大、分布均匀的橘红色颗粒;细胞核染成紫蓝色,多分成两叶。
(4)嗜碱性粒细胞:数量极少,很难找到。细胞圆形;细胞质内含有大小不一、分布不均的紫蓝色颗粒;细胞核呈S形或不规则形,染色浅,常被嗜碱性颗粒遮盖而观察不清。
(5)淋巴细胞:细胞质较少,染成天蓝色;细胞核呈圆形或卵圆形,染成深蓝色。
(6)单核细胞:细胞质较多,染成浅灰蓝色;细胞核呈肾形或蹄铁形,常位于细胞的一侧。细胞核染成蓝色,但比淋巴细胞的细胞核染色浅。
(7)血小板:呈不规则的紫蓝色小体,血小板常成群存在,分布在细胞之间。
三、观察并绘图
疏松结缔组织(皮下疏松结缔组织铺片,台盼蓝活体注射,HE染色)
1.肉眼观察:标本染成淡紫红色。选择铺片较薄的部位进行低倍镜观察。
2.低倍观察:在视野内的纤维交织成网,细胞分散在纤维之间。胶原纤维呈淡红色,粗细不等,有的弯曲呈波纹状;弹性纤维呈暗红色,较细而直;纤维之间散在许多结缔组织细胞。选择细胞和纤维分布均匀、结构清晰的部位,移至视野中央,换高倍镜观察。
3.高倍观察:成纤维细胞多呈星形或梭形,数量较多。细胞质染成极浅的淡红色,所以细胞的轮廓不甚清楚;细胞核呈椭圆形,染成紫蓝色。巨噬细胞的外形不规则,细胞质中含有吞噬的台盼蓝颗粒(颗粒呈蓝色);细胞核较成纤维细胞的略小,呈圆形,染成深紫蓝色。
在高倍镜下绘疏松结缔组织图,注明成纤维细胞、巨噬细胞、胶原纤维和弹性纤维。
(朱祖明、徐忠勇)