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第9章 常用器械及仪器设备(8)

测量时,先用蒸馏水冲洗两电极,用滤纸轻轻吸干电极上残余的溶液,或用待测液洗电极。然后,将电极浸入盛有待测溶液的烧杯中,轻轻摇动烧杯,使溶液均匀。按下读数开关,指针所指示的数值即为待测溶液的pH值。重复几次,直到数值不变(数字式pH计在约10s内数值变化少于0.01pH值时),表明已达到稳定读数。测量完毕,关闭电源,冲洗电极,玻璃电极要浸泡在蒸馏水中。

4.酸度计维护玻璃电极在初次使用前,必须在蒸馏水中浸泡一昼夜以上,平时也应浸泡在蒸馏水中,以备随时使用。玻璃电极不要与强吸水溶剂接触太久,在强碱溶液中使用应尽快操作,用毕立即用水洗净。玻璃电极球泡膜很薄,不能与玻璃杯及硬物相碰;玻璃膜沾上油污时,应先用酒精,再用四氯化碳或乙醚,最后用酒精浸泡,再用蒸馏水洗净。如测定含蛋白质溶液的pH值时,电极表面被蛋白质污染,导致读数不可靠,也不稳定,出现误差,这时可将电极浸泡在稀HCI(0.1mol/L)中4-6分钟来矫正。电极清洗后只能用滤纸轻轻吸干,切勿用织物擦抹,否则会使电极产生静电荷而导致读数错误。甘汞电极在使用时,注意电极内要充满氯化钾溶液,应无气泡,防止断路。应有少许氯化钾结晶存在,以使溶液保持饱和状态,使用时拔去电极顶端的橡皮塞,从毛细管中流出少量的氯化钾溶液,使测定结果可靠。

另外,pH测定的准确性取决于标准缓冲液的准确性。酸度计用的标准缓冲液,要求有较大的稳定性,较小的温度依赖性。

十一、切片机

1.切片机的用途和类型在近代组织学和细胞学的研究中,显微制片是最基本的技术,是进行教学和科研的一个重要环节,也广泛应用于临床,这是病理学诊断的一个基本方法。

显微制片有许多不同的方法,切片法是其中的一种,切片机就是在制作各种组织切片时要用到的一种专用精密机械。切片机的种类很多,根据其性能大致可分为旋转式切片机和滑行式切片机两大类。外加制冷装置就成为冷冻切片机。

旋转式切片机最适于作石蜡切片,装上冷冻装置后,就可作冷冻切片。

滑行式切片机用途很广,不但可切一般未包埋的材料,如木材、木质茎和坚韧的草质茎,也可用来作火棉胶切片、冰冻切片和石蜡片,缺点是不能作连续切片,故石蜡切片一般不用此种切片机制作。

冷冻切片前无需经有机溶剂脱水透明及高温浸蜡等处理,可避免许多人工效应,且切片不易收缩,有利于许多神经组织切片,适于保存脂肪组织和组织化学的研究。其缺点是不适于制作连续切片,切片一般较厚,多在8μm以上。

2.切片机原理和结构切片机的结构均包括3个部分:

2.1控制切片厚度的微动装置,也就是供料装置。

2.2供装置切片刀的部分。

2.3供装置组织块的夹物。

将切片机装置在特别设计的冷冻器内就是冷冻切片机。旋转式切片机的夹物部分是能够上下移动、前后推进的,而夹刀部分则固定不动。夹物部分后面连接着控制切片厚度的微动装置。夹刀部分在切片机的前面,其刀口与夹物部分上的组织垂直。用手将旋转轮摇转一次,夹物部的水平圆柱体也随着上下来回移动一次。向下移动经过刀口时组织块即被切去一片,然后向上移动,经过刀口后,就按所调节的厚度由微动装置以水平方向将组织块向前推进一片的厚度,这样连续地摇转,石蜡块就被切成连续的蜡带,最薄可达2μm。

滑行式切片机的夹刀部分是滑动的,夹物部分可上下升降。夹物部分也连接着控制切片厚度的微动装置,当夹刀部分在滑行的轨道上向后滑行一次,组织块就被切去一片,当夹刀部再从轨道上退回原处时,微动装置就自动地将组织块上移一片的厚度,切片厚度可用微动装置上的厚度计来调节。一般在2-40μm范围之内。冷冻式切片机由控制台分别调控冷冻箱和冷冻材料的温度,由于恒冷箱切片机使用的切片刀、组织材料切片及贴片的操作都保持在恒温环境下,因而可达到较好的切片效果。

3.切片机的调试和使用

3.1旋转式切片机

3.1.1将修整好的蜡块装在切片机的夹物部分。

3.1.2装夹切片刀,刀口向上,并调整切片刀角度。一般切片刀的斜度应调至4-6度。

3.1.3移动切片刀固定器,调整夹刀部与夹物部之间的距离,蜡块端部不可超过刀口,以石蜡块的表面刚贴近刀口为度,再旋紧切片刀固定器的螺旋。

3.1.4调整石蜡块与刀口之间的角度与位置,石蜡块的切面和下边须与刀口平行,如不平行可调节夹物部上的螺旋。

3.1.5调整厚度计到所要切片的厚度,一般石蜡切片的厚度约在4-8μm之间。

3.1.6右手握住旋转轮手柄,摇动一圈就切下一片。切下的蜡片粘在刀口上,待第二片切下时就连在一起,所以连续摇转就可将切下的蜡片连成一条蜡带。这时左手就可持毛笔(或解剖针)将蜡带提起,边摇边移蜡带,摇转的速度不可太急,通常以每分钟40-50转为宜。

3.1.7切成的蜡带到所需长度,即以右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起,立即进行展片、贴片或暂时平放在蜡光纸上。

3.2滑行式切片机

3.2.1将所要切的材料固定在夹物部分,调整好松紧度,材料应深人,仅留极短的部分(约2mm)露在夹物部上。

3.2.2将夹刀部推到顶端,旋松刀片夹的螺旋,将切片刀按适当角度安装好,并旋紧螺旋。

3.2.3调节切片机上的微动装置,使厚度达到所需切片的厚度。调节时应注意指针不可在两个刻度之间,否则容易损伤切片机。

3.2.4将夹刀慢慢推向夹物部,使刀口接近组织块,此时应查看材料与刀口上下的距离,同时调节升降器,使材料的刀面在刀口之下,以稍稍接触为度。

3.2.5调试完毕,右手推动夹刀部,使切片刀沿滑行轨道来回移动一次,当刀口由顶端向后移动经过材料时,夹物部就按规定厚度上升。切下的片子用毛笔取下或作展片。

3.3冷冻切片机

3.3.1启动冷冻箱开关,并调节达到合适的冷却温度(一般约-30℃)。

3.3.2开启材料冷冻台制冷开关,在冷冻台滴加适量冻胶液,将所需切片的组织材料埋置妥当,使材料迅速冻结。

3.3.3调整切片刀的角度与切削厚度,进行试切。温度适宜时,切片的效果较好,这因材料不同而各异,要多实践摸索掌握。一般材料的切片温度在-20℃~-25℃。

3.3.4切片操作分别与上述两类切片相同。切片切出后即进行贴片,将组织材料停在切片刀下面,用干净的室温载片轻触切片,切片便会自动平展贴于载片上。

4.切片机的维护切片完毕,切片刀和切片机都要进行清理,妥善维护:

4.1切片刀刀口很薄也很锋利,故应避免触及坚硬物体,以免碰伤;盐分、汗水或水分沾在刀上都易使刀生锈,故用后需用酒精棉球将刀面擦干净,再用纱布抹干后,放入切片刀盒中保存,如在较长时期内不用,须涂上一薄层凡士林或液体石蜡加以保护。

4.2切片机各部分应擦拭干净,加入机油润滑机件,然后盖上护罩或护盖,以备下次再用。

4.3冷冻切片机由于冷冻的关系,须在关闭制冷开关后温度达到室温时才进行,若在短期内还要切片,可调整箱温在-10℃左右备用,但切片机和切片刀要清扫干净,备用。

十二、洗板机

1.洗板机的用途和类型用于96孔反应板洗涤、加液。适用于ELISA、FS、化学发光、细胞试验等。根据工作方式可分为手动洗板机和自动洗板机。

2.洗板机的原理和结构手动洗板机由储洗液瓶和8或12通道分液器组成,结构简单。全自动洗板机由微电脑控制系统、水泵、控制阀门和8或12通道、96通道加样头组成,可以编写、储存多个程序,设置流速、流量、洗涤方式,自动加液和吸弃废液,实现洗板、低精度分配液体的自动化。

3.洗板机的使用洗板机型号很多,现以El×50全自动洗板机为例,介绍使用方法。

3.1按ON/OFF键,打开电源,仪器自检后显示主菜单“RUN DEFINE MAINT UTIL”。

3.2按键RUN键,仪器显示“SELECT PROGRAM TYPEWASH PRIME DISP ASPIR”,选择WASH(选择DEFINE可以编程)。

3.3选择清洗程序号,显示PRIME THE WASHER?选择YES仪器进行初始化清洗。

3.4仪器显示“NUMBER OF STRIPS”(板孔行数),输入所需数量。

3.5将微量反应板放人载板台,按键,开始洗涤。

3.6仪器显示“WASH PROGRAM RUNNING...”,按STOP键,可退出清洗程序。

3.7清洗程序运行完毕,按ENTER键确认,回到主菜单。

3.8取出板条,清理板台,关闭电源,做好使用记录。

4.洗板机的维护洗板机应随时保持干燥,擦拭前先切断电源,以防触电。应避免使用次氯酸钠等腐蚀性液体。日常维护通常用去离子水,在使用后当天清洗,防止阻塞。清洗时可选用MAINT程序中的前三种方式。如果Elx50洗板机长期放置不用,应使用MAINT下的“LONG SHUT DOWN”进行去污洗涤、清洗和晾干。该程序启动时需50ml去污剂和100ml去离子水,按提示信息接入。

十三、颗粒制冰机

1.颗粒制冰机的用途用于制备片状、颗粒状、雪花状冰块,供生物学实验中随时降温、冰浴使用。

2.颗粒制冰机的使用

2.1该机由电子部分、制冰部分和颗粒冰推进部分组成,按程序工作。每小时可制冰5公斤,储冰量可达20公斤,24小时连续制冰(制冰机型号不同,制冰量有所不同)。

2.2开机前切记检查水源是否接通,机器背面左下侧粗的进口用橡胶管套紧并接自来水,接好扎牢后方可打开水源(注意:进水压在1.4—4.0kg/cm2)

2.3开启水源后,只需打开正面的电源开关,机器就会按程序工作。若水源停止供水时,应关闭机器。

2.4在制冰过程中应关闭储冰室门,整机在开机15分钟后方可出冰;1小时后取冰,这时的冰温度最低(-8℃),硬度最强。

2.5机器背面右下侧有个放水口,接上一根长30cm的橡胶管引至一只存水盆,收集致冷过程中的水滴和融化的冰水。

2.6当储冰室冰满后通过电子控制自动停机,当取出部分冰后,机器又自动工作制冰。

3.颗粒制冰机的维护

3.1本机为水冷散热型机组,要求通风良好,离墙和其他物之间距离应大于30厘米。

3.2整机应保持干净,机器上面不应放杂物,严禁通电时搬动。

3.3关机后,应关闭水源。当较长时间不使用时,应清理擦干储冰室等部件。

十四、微量振荡器

1.振荡器的用途振荡器为医院、科研单位、大专院校、卫生防疫站等单位开展免疫学、病毒学、细菌学、流行病学以及生化检验必不可少的器材,用于微量样品的振荡混合。

2.振荡器工作原理振荡器是利用微型电机的转动,带动偏心轮产生力矩使之形成机械振动。当电机上的电压改变时,电机转速相应改变,而按一定的力学原理改变由此产生的机械振动,使之托盘上的血凝板同时振动,达到孔内液体的均匀混和。

3.使用方法将本仪器放在平稳的桌面上,取出托盘下面的衬纸,将混合微量反应板平放在托盘上,将插头接通附近的220V电源,拨动台面上的电源开关,调整你所需要的振荡频率,即“转速旋钮”使之达到所需的工作频率。

4.振荡器的维护

4.1仪器供电电源标准值为220V,仪器备有熔丝保险装置,在超载时能自动断路,只需更换熔丝管,即可正常运转。

4.2仪器在运输、存放或移动时,切勿在仪器托盘上重压,防止损坏机件。

4.3仪器必须防潮、防湿,妥善保管。

十五、旋涡混合器

1.旋涡混合器的用途旋涡混合器是化验分析的常规设备,取代科研人员频繁的挥臂摇动操作,减轻劳动强度,它具有使容器中的液体,及少量的固体充分混合和溶解,达到快速混匀、反应等功能,用于生物化学、医药卫生、环保、化工、工矿企业等单位的化验分析。

2.旋涡混合器的功能该仪器耐腐蚀、操作简便、效率高,只要手拿试管或三角烧瓶放在海绵振动面上,就可以获得满意的振荡,其振荡强弱还可以根据手拿器具压在海绵振动面上的压力大小来调节。

3.旋涡混合器的使用和维护

3.1该仪器应放在较平滑的地方,最好在玻璃台面上。轻轻按下该仪器。使仪器底部的橡胶脚与台面相吸。

3.2电源插头插入220V交流电源,开启电源开关,选择点动/连动档。选择点动时,用手拿住试管或三角烧瓶,平放在海绵振动面上并略施压力,机器开始转动,在试管内的溶液就产生旋涡,而三角烧瓶中则起高低不等的水泡,达到混合的目的;选择连动时,开启电源后机器即连续转动,只需将试管或三角烧瓶轻放在海绵振动面上即可进行操作。注意容器中被混合液体的体积,一般以不超过容器容积的l/2为佳。

3.3如开启电源开关后,电机不转动,应检查插头接触是否良好,保险丝是否烧断(应断电进行)。

3.4使用中切勿使液体流人机芯,以免损坏器件。用后应擦干,放在干燥无腐蚀气体之处。