三十、培养基
1.液体培养基
1.1NZCYM培养基：NZamine 10g
NaCl 5g
酵母膏5g
酪蛋白水解物1g
MgS04·7H202g
NaOH调pH到7.5，配成1000ml。
NZYM培养基NZCYM培养基中省去酪蛋白水解物。
1.2LB（YT）培养基：蛋白胨10g
酵母膏5g
NaCl 10g
NaOH调pH到7.5配成1000ml。
1.3M9培养基：Na2HP046g
KH2P043g
NaCl 0.5g
NH4Cl lg
水900ml
调pH到7.4高压锅灭菌，凉后添加：
Lmol/L MgSO42ml（单独高压锅灭菌）
20％葡萄糖10ml（过滤除菌）
Lmol/L CaCl 20.1ml（单独高压锅灭菌）
加无菌水到1000ml。
1.4M9CA培养基1L M9培养基中加入2g酪蛋白水解物即为M9CA培养基。
1.5X1776培养基：蛋白胨25g
酵母膏7.5g
1mol/L pH7.5Tris-cl 20ml 加水900ml
高压锅灭菌，凉后添加：
Lmol/L MgCl25ml
1％二氨基庚二酸10ml
0.4％胸腺嘧啶核苷10ml
20％葡萄糖10ml
（MgCl2单独高压灭菌，其余分别过滤除菌）
加入无菌水到1000ml。
1.6SOB培养基：蛋白胨20g
酵母膏5g
NaCl 0.5g
加水900ml，KOH调pH到7.5，高压灭菌，凉后添加：
Lmol/L MgSO420ml加入无菌水到1000ml。
2.固体培养基上述这些培养基中，在灭菌前加琼脂或琼脂糖便成为固体培养基；每1000ml中加入琼脂或琼脂糖：
平板琼脂培养基琼脂15g
顶层琼脂培养基琼脂7g
平板琼脂糖培养基琼脂糖15g
顶层琼脂糖培养基琼脂糖7g
说明：试剂过滤除菌可用0.2um或0.45um的滤膜滤器。
第七节其它
一、常用血液抗凝剂
1.肝素（Heparin）肝素的抗凝血作用很强，常用来作为全身抗凝剂，特别是在进行微循环方面动物实验时的肝素应用更有重要意义。
纯的肝素10mg能抗凝100ml血液（按1mg等于100个国际单位，10个国际单位能抗凝1ml血液计）。如果肝素的纯度不高，或过期，所用的剂量应增大2～3倍。用于试管内抗凝时，一般可配成1%肝素生理盐水溶液，取0.1ml加入试管内，加热80℃烘干，每管能使5～10ml血液不凝固。
2.枸橼酸钠它与血液中钙离子形成非离子化的可溶性钙化合物而起抗凝作用，溶解度和抗凝度较弱，5mg可抗凝lmL血液。使用时配成3.8％溶液0.5mL可抗凝5mL全血。主要用于红细胞沉降速率的测定和输血，一般不作为生化检验的抗凝剂。其优点是毒性小，可作为血液保养液。
3.乙二胺四乙酸二钠（DETA-Na2）：与钙离子形成EDTA-Ca螯合物而起抗凝作用，lmL血液需1～2mg，常配成10％溶液，取此液2滴加入试管或玻瓶中，置50℃～60℃干燥箱中烘干备用，可抗凝5mL血液。由于此物质对血细胞和血小板形态影响较小而功能影响较大，故常用于一般血液检查，不用于血小板功能检查。当样品中加入高浓度的此类抗凝剂时，可发生溶血和改变血液pH，干扰血浆中钾、钠和氨的测定，且抑制有些酶的活性，其优点是溶解好，价廉。
4.肝素：肝素广泛存在于肺、肝、脾及肥大细胞和嗜碱粒细胞的颗粒中，是一种硫酸基团的黏多糖，通过与抗凝血酶一Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血，使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白。0.1～0.2mg或201U（1mg相当于126IU）可抗凝lmL血液；常配成l％溶液，加入试管或玻瓶后在37℃左右烘干备用，适用于大多试验诊断的检查。其优点是抗凝作用强，不影响血细胞的体积，不致溶血等，缺点是白细胞的染色性较差。可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。
5.草酸盐与血液中钙离子结合形成不溶性草酸钙而起抗凝作用。lmL血液用2mg草酸盐即可抗凝。常用的草酸盐为草酸钾、草酸钠等，配成10％溶液，根据抗凝血量加入试管或玻瓶中，置45℃～55℃（不超过80℃）烘箱内烤干备用。此抗凝剂不适宜钾、钠和钙含量的测定，并且能使红细胞缩小6％，故也不适宜红细胞压积容量的测定。临床上一般用草酸盐合剂，配方为草酸钾0.8g、草酸铵1.2g，加蒸馏水100mL溶解，取此液0.5mL加入试管或玻瓶中，可抗凝5mL血液。此抗凝剂能保持红细胞的体积不变（草酸铵使红细胞膨胀，草酸钾使红细胞皱缩），适用于血液细胞学检查，但不适用于非蛋白氮、血氨等含氮物质和钾、钙的测定。
二、常用消毒剂
1.酒精70%酒精杀菌力最强，它能使蛋白质脱水和变性，在3～5分钟内杀死细菌。因此，它用于消毒和防腐，适用于皮肤和器械、塑料制品等的消毒。高浓度的酒精（95～100%）能引起菌体表层蛋白质凝固，形成保护层，使酒精分子不易透入，因此杀菌能力反而弱。配方：95％乙醇70mL加水25m1。
2.碘酒：碘酒是碘和碘化钾的洒精溶液，2%的碘酒在10分钟内能杀死细菌和芽孢，可用于皮肤的消毒。配方：碘化钾2.5g、碘3.5g、95％酒精、蒸馏水27ml。先取碘化钾溶在2ml蒸馏水中，再加入碘，搅拌后加入酒精，到碘充分溶解后，补足蒸镏水，即成碘酒。碘酊：用碘7g，碘化钾5g，溶于100m195％乙醇中。
3.高锰酸钾高锰酸钾是强氧化剂，有很强杀菌作用。0.1%水溶液用作皮肤消毒，2～5%水溶液能在24小时内杀死细菌芽孢。溶液在空气中易分解，要现用现配。常用1：1000。1g高锰酸钾溶于1000mL水中。
4.苯酚（石炭酸）石炭酸是有效的常用杀菌剂，1%水溶液能杀死大多数的菌体，通常用3～5%水溶液作接种室喷雾消毒或器皿的消毒，5%以上溶液对皮肤有刺激性。在生物制品中，加入0.5%石炭酸可作防腐剂。
5.新洁尔灭新洁尔灭是常用的消毒剂，主要用于皮肤、医疗器械、器皿、接种室空气等的消毒灭菌，对许多非芽孢型病原菌、革兰氏阳性菌和阴性菌经几分钟接触即灭菌，尤其对革兰氏阳性菌杀菌力更大。本品原液的浓度是5%，通常用0.1—0.25％水溶液。配方：5％新洁尔灭5m1加水95ml。用新洁尔灭消毒金属器械时，要在1升溶液中加入5克亚硝酸钠，以防生锈。
6.福尔马林是常用的杀细菌、真菌剂。2—5%水溶液能在24h1内杀死细菌芽孢，常用来消毒器皿和器具。如果用作无菌室等房屋消毒，取100ml福尔马林，放在盆见风使舵，用小火微热，促使蒸发，在10h内可消菌3立方米左右体积房屋的空气。
7.升汞水溶液常用0.1％。升汞1g，盐酸2.5mL混合后加水997.5ml。
8.漂白粉常用10％。10g漂白粉加水100m1。
9.双氧水常用1：l。5m1双氧水加5ml水。
10.来苏儿常用2％。50％来苏儿40mL加水96m1。
11.石灰石灰是一种价廉易得的良好消毒药，其干粉无杀菌作用，加水生成氢氧化钙后有杀菌作用。1％的石灰水，在数小时内可杀死普通繁殖型细菌；3％的石灰水，经过1小时可杀死禽沙门氏菌。石灰为养禽场（户）的常用消毒防腐药物，可预防多种传染病和某些寄生虫病，使用方法有两种：①石灰20份，加水到100份，搅匀，制成石灰乳。涂刷禽舍的墙壁。必须现用现配；②用20％的石灰乳浸湿草包或麻袋，放入禽舍门口，让人员来往践踏，消毒鞋底，这可预防由出入人员携带来的病菌而引起的疾病。有的采用撒干石灰粉的办法，但只能引人注目，不起消毒作用。
12.草木灰草木灰含有氢氧化钾和碳酸钾等化学成分。其30％的水溶液，可杀死繁殖型细菌和病毒，常用于某些细菌性和病毒性传染病的消毒，如鸡白痢、鸡新城疫、禽霍乱、鸭瘟等。用法：新鲜草木炭按30％的比例与水配合，放锅内煮沸1小时，滤渣，加水至30％的浓度，再加热至70℃，趁热应用。一般用其消毒养禽场、肉联厂等地面、饲槽、台板、木制用具。运禽车辆等。应用时注意：①加热后应用，可提高消毒效果；②加入10％食盐，可增强消毒效果。③对皮肤和器官有灼伤作用，不可用作禽体消毒。消毒时，应将禽赶至舍外。操作人员要注意防护，以免受灼伤；④本药对纺织品、铝制品有腐蚀作用，此类用品不可用本药消毒；⑤为防止车辆受损害，本药消毒后6～12小时，应用清水将消毒液彻底冲洗掉。
13.烧碱指氢氧化钠，是一种很有效的消毒剂。其2％～4％的溶液，可杀死繁殖型细菌和病毒；5％～10％的溶液，24小时可杀死结核杆菌。其消毒作用和使用时注意事项与草木灰相同。
14.碱面其化学名称为碳酸钠，在高温水溶液中可分解生成氢氧化钠和碳酸氢钠，呈现杀菌作用。20％的溶液，在35℃的环境中，30分钟可杀死沙门氏菌。如升高至50℃，1分钟即可杀死沙门氏菌，应用时，常配成4％的热水溶液，浸泡消毒被沙门氏菌和病毒污染的衣物；或洗刷消毒被病原微生物污染的病禽用具、饲养用具、运禽车船和病禽停留场地。此外，用1％的溶液，煮沸消毒外科器械，可增强消毒作用，并有去污、防锈等作用。
15.食醋其作用与乳酸相似，无乳酸时可作乳酸的代用品，作熏蒸消毒之用。方法：每立方米空间用10mL食醋，加1升水稀释，置于容器中加热蒸发，以其蒸汽进行熏蒸消毒。熏时紧闭门窗，熏完后不必大开门窗驱除残汽。熏时，人和家禽不必离去，对人有益无害。此法适用于鸡喉气管炎、鸡支气管炎、鸡交原体病等。另外，初生雏鸡每天饮服1份食醋、20份水配成的醋水，可预防白痢病。
三、封片剂
1.加拿大树胶加拿大树胶是半透明的固体树脂，能溶于二甲苯、苯等溶剂。加拿大树胶溶于二甲苯后，它的折光率是1.52，接近于玻璃的折光率（1.51），透明度很好，用以封片几乎无色，干后坚硬牢固，可长期保存。因此，他是封片常用的封藏剂。市售的加拿大树脂有浓液体和固体两种。如果是固体，可以在树胶中加入约相当于树胶体积一半量的二甲苯，放在温暖处，时常搅拌，促使树胶溶化。溶化后的胶液浓度以胶液能沿玻璃棒一端顺利下流为宜（如果要封藏后使它干燥更快，可用苯代替二甲苯）。
加拿大树胶在使用和贮存时应注意：①不能加热，否则树胶立即变成深褐色，影响封片后的观察；②树胶应贮存在棕色瓶内，避光保存；③玻璃瓶口应密闭，以防蒸发凝固；④为了防止树胶变酸，在树胶内加入几小块用二甲苯清洗过的大理石，以中和酸性。
2.阿拉伯树胶用阿拉伯树胶作为封藏剂的优点是便于在这种封藏剂中整理标本形态。阿拉伯树胶作为封藏剂有多种配方，下述配方适于小型昆虫的整体状片。配方：阿拉伯树胶8g，水合氯醛20～40g，甘油5ml，冰醋酸3ml（可略）蒸馏水10ml。配置方法：先把纯净的阿拉伯树胶放在蒸馏水里，加热，待胶溶化后，加入水合氯醛，边加边搅拌，使它充分溶解后加入甘油和冰醋酸，搅拌均匀后，贮存在瓶里，密闭保存。贮存时要避免灰尘或湿气浸入。3.乳酸-石炭酸这种封藏剂用于整体装片，尤其适用于封藏藻类、菌类、苔藓的原叶体或其他较小材料。配方：石炭酸1份，乳酸1份，甘油1～2份，蒸馏水1份。