奶牛的射精量一般为每次4～8毫升，过多或过少都必须查明原因。若射精量太多，可能是由于副性腺分泌物过多或尿液混入；如过少，可能是由于采精技术不当、采精过频或生殖器官机能衰退所致。正常的精液颜色是乳白色、不透明黏液，有时为乳黄色。若精液颜色异常，表明公牛生殖器官有疾病，应该弃去或停止采精。正常精液略有腥味。
（二）精子密度检查
精子密度指每毫升精液中所含有的精子数目，由此可计算出每次射精的总精子数，它直接关系到输精量和有效精子数。
（三）精子活率检查
精子活率是指在精液中呈直线前进的精子数所占的百分率，与精子受精力密切相关。检查时，因牛精液密度较大，通常用生理盐水或等渗稀释液稀释后，取1滴精液于载玻片上制成压片标本，置38℃恒温显微镜载物台上在400倍下观察。
对种公牛的精子活率采用10级评分法：视野中100％直线运动者评为10；90％者为09；80％者为08，以下类推。牛的精液（原精）活率一般在08～09，低于06不能用来制作冷冻精液。冷冻精液解冻后的活率不能低于03，低于03者不能使用。
（四）精子形态学检查
精液形态正常与否对受精率有密切关系。假若精液中含有大量畸形精子和顶体异常精子，则受精能力就会降低。
三、精液的稀释
（一）精液稀释的目的
（1）扩大精液量，提高优良种公牛的利用率1次采出的精液，如按原精液进行输精，1头母牛的输精量为1毫升，只能输4～6头母牛。实际上1毫升精液有3～20亿精子，而1头母牛输精需要的直线前进运动的精子只有1500万～2000
万，所以浪费很多。将精液加以稀释后，就可扩大输精头数。
（2）延长精子存活时间。稀释液中含有营养物质和缓冲物质，可以补充营养及中和精子代谢产物，防止精子受低温打击。
（二）冷冻稀释液
冷冻稀释液的成分一般应含有低温保护剂（卵黄、牛奶）、防冻保护剂（甘油）、维持渗透压物质（糖类、柠檬酸钠）、抗菌素及其他添加剂。根据配制要求和稀释的需要将冷冻稀释液配制成基础液、Ⅰ液、Ⅱ液三种溶液，以便于在生产中使用。
（三）稀释
采出的精液在等温条件下立即用不含甘油的第Ⅰ稀释液作第一次稀释，稀释比例应根据精液品质作1～2倍稀释，然后，经40～60分钟缓慢降温至4～5℃，再加入等温的含甘油的第Ⅱ稀释液，加入量为第一次稀释后的精液量。
四、精液的平衡
将稀释好的精液放入2～5℃冰箱或冰瓶内静置2～4小时，使甘油充分渗透进入精子体内，产生抗冻保护作用。
五、精液冷冻和储藏
主要有细管冷冻、颗粒冷冻两种方法。
在装有液氮的容器上放置一薄铝板或金属网，如用聚四氟乙烯塑料板则精液冷冻效果更好。冷冻板和液氮面的距离在05～15厘米之间，使其温度维持在-80～-100℃。待冷冻板充分冷却后，用玻璃吸管吸取精液定量连续滴在冷冻板上，每个颗粒体积为01毫升，经过3～5分钟，精液充分冻结颜色变白、颗粒色泽发亮时，将精液颗粒收集于贮精瓶内，移入液氮内保存。
六、冷冻精液的保存
（1）冷冻精液的包装上须明确标明公牛品种、牛号、生产日期、精子活率及数量，再按照公牛品种及牛号将冷冻精液装入液氮罐提筒内，浸入固定的液氮罐内贮存。
（2）定期添加液氮，不使罐内贮存的颗粒冷冻精液或细管精液暴露在液氮面上，且液氮容量不能少于2／3。用绳子拴系的精液包装物，切勿因绳索缠结使得精液未能浸入液氮内而长时间悬吊于液氮罐中，使温度升高。
（3）在液氮中提取冷冻精液时，不得提出液氮罐口外，而置于罐颈之下。要用电筒照看清楚，用镊子夹取精液，做到目标准确、动作利索。精液每次脱离液氮时间不得超过5秒钟。
（4）贮存精液的液氮罐应放置在干燥、凉爽、通风和安全的专用室内，要水平放置，不倾斜，还要经常检查盖子是否泄漏氮气。
七、 冷冻精液的运输
由冷冻精液站提供的冷冻精液必须经过精子活率检查，查验公畜品种、畜号及数量与标签一致无误后方可运输。盛装精液的液氮罐必须确保其保温性能，液氮罐应罩有保护袋或装入木箱内，牢固稳妥，严禁撞击和翻倒。另外运输途中要减少震动，超过期限要注意补充冷源。当精液运达输精站时要办理好交接手续。
八、冷冻精液的解冻
由于剂型不同，冷冻精液的解冻方法也有差别。颗粒冻精解冻的稀释液要另配，细管冷冻精液不需要解冻稀释液。
1颗粒精液的解冻
先要配制解冻稀释液，一般常用的是29％柠檬酸溶液、维生素B（05毫克／毫升）溶液、葡柠液（葡萄糖3％、二水柠檬酸钠14％）。各种解冻液均可分装于玻璃安瓿中，经灭菌后长期备用。
解冻时，先取1～15毫升解冻液放入小试管内，浸入40℃热水中，经2～3分钟后投入1～2粒精液颗粒。待溶化1／2～1／3时即取出精液试管，在常温下轻轻摇动至完全解冻后，检查评定精子活率，然后进行输精。
2细管精液的解冻
由液氮罐内迅速取出1支细管冷冻精液，立即投入40℃热水中，待精液基本溶化时，用灭菌小剪剪去细管的封口端，装入细管输精器中。细管精液品质检查，可按批抽样评定，不需每支精液均作检查，否则将会减少每头份精液的输精量及输入精子数。
3注意事项
精液解冻后必须保持所要求的温度，严防在操作过程中温度出现回升或回降。冷冻精液解冻后不宜存放时间过长，应在1小时内输精。
九、输精方法
冷冻精液输入母畜生殖道以后，其存活时间大大缩短，这就给选定输精时机提出了更高的要求，输精时间过早，待卵子排出后，精子已衰老死亡；输精过晚，排卵后输精的受胎率又很低。所以使用冷冻精液输精的时间应当比使用新鲜精液适当推迟，输精间隔时间也应该短一些，与用新鲜精液作比较，一般用冷冻精液输入母畜生殖道的有效精子数大为减少，要求将每头份的精液全部输入到子宫颈内口以前的部位，才能保证较高的受胎率。所以，牛冷冻精液输精不可采用输精部位较浅的开腔器输精法，应用输精部位可达子宫颈内口和子宫体的直肠把握深部输精法。
直肠把握输精法是输精人员的手臂插入母牛的直肠，通过直肠把握固定好子宫颈，另只手将盛有精液的输精器经母牛阴道，插入到子宫颈内口注入精液。它是牛人工授精操作中最后一个步骤，也是一个重要的环节。
（一）输精前的准备
1输精器的准备
牛用玻璃或金属输精器可用蒸汽、75%酒精或放入高温干燥箱内消毒；输精胶管因不宜高温，可用酒精或蒸汽消毒。输精器宜每头母牛准备1支。
2母牛的准备
将接受输精的母牛固定在六柱栏内，尾巴固定于一侧，用01%新洁尔灭溶液清洗消毒外阴部，再用酒精棉球擦拭。
3输精人员的准备
输精员要身着工作服，指甲剪短磨光，戴1次性直肠检查手套或手臂洗净擦干后用75％酒精消毒，待完全挥发干再持输精器。
4精液的准备
颗粒冷冻精液解冻后，用输精器吸取后进行。塑料细管精液解冻后装入金属输精器。
金属输精器使用方法是将输精器推杆向后退10厘米左右，装入塑料细管，有棉塞的一端插入输精器推杆上，深约05厘米，将另一端聚乙烯醇封口剪去，套上钢管套外层的塑料套管，其中固定细管用的游子应随同细管轻轻推至塑料套管的顶端，试推推杆由细管内渗出精液即可进行输精。
（二）输精
1直肠把握子宫颈输精法术者左手臂上涂擦润滑剂后，左手呈楔形插入母牛直肠，触摸子宫、卵巢、子宫颈的位置，并令母牛排除畜粪，然后消毒外阴部。为了保护输精器在插入阴道前不被污染，可先使左手4指留在肛门后，向下压拉肛门下缘，同时用左手拇指压在阴唇上并向上提拉，使阴门张开，右手趁势将输精器插入阴道。左手再进入直肠，摸清子宫颈后，左手心朝向右侧握住子宫颈，无名指平行握在子宫颈外口周围，这时要把子宫颈外口握在手中，假如握得太靠前会使颈口游离下垂，造成输精器不易对上颈口。右手持装有精液的输精器，向左手心中深插，输精器即可进入子宫颈外口。然后，多处转换方向向前探插，同时用左手将子宫颈前段稍作抬高，并向输精器上套。输精器通过子宫颈管内的皱褶时，会有明显的感觉，当输精器一旦越过子宫颈皱褶，立即感到畅通无阻，这时即抵达子宫体处。
当输精器处在子宫颈管内时，手指是摸不到的，输精器一进入子宫体，即可很清楚地触摸到输精器的前段。确认输精器进入子宫体时，应向后抽退一点，勿使子宫壁堵塞住输精器尖端出口处，然后缓慢地、顺利地将精液注入，再轻轻地抽出输精器。
2输精注意要点
输精操作时，若母牛努责过甚，可采用喂给饲草、捏腰、拍打眼睛、按摩阴蒂等方法使之缓解。若母牛直肠呈罐状时，可用手臂在直肠中前后抽动以促使松弛。操作时动作要谨慎，防止损伤子宫颈和子宫体。关于输精的深度，据试验，子宫颈深部、子宫体、子宫角等不同部位输精的受胎率没有显著差别。但是输精部位过深容易引起子宫感染或损伤，所以采取子宫颈深部或子宫体输精比较安全。
（第四节）母牛的妊娠及分娩
一、母牛的妊娠
经配种受胎后的母牛，即进入妊娠状态。妊娠是母牛的一种特殊生理状态，是指从受精卵沿着输卵管下行，经过卵裂、桑葚胚和囊胚、附植等阶段，形成新个体即胎儿，胎儿发育威熟后与其附属膜共同排出前的整个过程。从受精卵开始，到胎儿分娩的生理过程称为妊娠期。
（一）母牛的妊娠期及预产期推算
1奶牛的妊娠期及影响因素
妊娠期是指受精后到分娩之间的天数。通常以最后一次交配或输精的那一天开始算起，到分娩为止。奶牛的妊娠期平均为282天，范围是260～290天。不同奶牛的妊娠天数由于其品种、年龄、胎儿的数目、性别以及环境因素等而略有差别。具体来说，不同品种的奶牛，其妊娠期略有不同，如黑白花牛279天，乳用短角牛282
天，老龄母牛怀孕期长，年轻母牛短；怀双胎的母牛，其妊娠期减少3～6天；怀雄性犊牛的母牛其妊娠期比怀雌性犊牛的母牛平均长1天，冬、春分娩的母牛其妊娠期比夏、秋季分娩的母牛平均长3天左右。另外，与配公牛也对母牛的妊娠期产生一定的影响。
2奶牛预产期推算
母牛妊娠后，为了做好生产安排和分娩前的准备工作，必须精确算出母牛的预产期。牛的预产期推算，如按280天妊娠期计算，则为配种月份加九或减三，日数加六，超过30则上进1个月。从最后一次输精时间算起。
例如，某牛于2000年2月26日最后一次输精，则其预产月份为2＋9=11月，预产日为26＋6=32日，由于超过30，上进1个月，则为12月2日预产。
又如，2000年10月4日最后一次输精的母牛，预产月为10-3=7月，预产日为4＋6=10日，即2001年7月10日预产。
（二）母牛妊娠的生理变化
1生殖器官的变化
（1）卵巢：妊娠后，卵巢上的黄体成为妊娠黄体，并以最大体积持续存在于整个妊娠期。卵巢上也可能有卵泡发育，但都在发育途中闭锁退化。
（2）子宫：随着妊娠进展，子宫体和子宫角随胚胎的生长发育而相应扩大。在整个妊娠期内，孕角的增长速度远大于空角，所以孕角和空角始终不对称。在妊娠前半期，子宫体积增长速度快于胎儿，子宫壁变得较原来肥厚。至妊娠后半期，子宫的增长速度没有胎儿及胎水增长快，从而子宫壁被动扩张而变薄。
妊娠后，子宫血流量增加，血管扩张变粗，尤其是动脉血管内膜皱褶变厚，加之和肌肉层的联系疏松，使原来间隔明显的动脉脉搏变为间隔不明显的颤动，即所谓妊娠脉搏（孕脉）。
2乳房的变化
妊娠开始后，在孕酮和雌激素作用下，乳房逐渐变得丰满，特别是到妊娠中后期，这种变化尤为明显。到分娩前几周，乳房显著增大，并能挤出少量乳汁。
3全身状态的变化